深低溫保藏細(xì)胞的解凍

深低溫保藏細(xì)胞的解凍
深低溫保藏的細(xì)胞十分脆弱，要輕柔操作?？焖俳鈨錾畹蜏乇２?br />的細(xì)胞，然后直接將其接種到*生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，如果細(xì)胞對(duì)抗
凍劑（DMSO或甘油）特別敏感，則離心除去抗凍劑，然后將細(xì)胞
接種到*生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。下面是深低溫保藏細(xì)胞的建議解凍步
驟：
直接接種法
1．從凍存管中取出細(xì)胞，用37℃水浴快速解凍。
2．將細(xì)胞直接接種到*生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。每毫升凍存細(xì)胞需要　
　10-20ml*生長(zhǎng)培養(yǎng)基。計(jì)算活細(xì)胞的個(gè)數(shù)。細(xì)胞接種量至
　少要達(dá)到3X105 活細(xì)胞/ml。
3．將細(xì)胞培養(yǎng)12-24h。更換新鮮*生長(zhǎng)培養(yǎng)基以去除抗凍劑。
離心法
1．從凍存管中取出細(xì)胞，用37℃水浴快速解凍。
2．將1-2ml 凍存細(xì)胞接種到大約25ml*生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。要非常
輕柔地進(jìn)行混合。
3．用大約80 X g的速度離心2-3分鐘。
4．吸除上清液。
5．用*生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕重懸解離下來(lái)的細(xì)胞，并計(jì)算活細(xì)胞的
個(gè)數(shù)。
6．接種細(xì)胞。細(xì)胞接種量至少要達(dá)到3X105 活細(xì)胞/ml。